Vaccinurile inactivate 1
Aceasta este cea mai complexă Biologics de compoziție.
Pentru virusurile virulente epizootice utilizate în general lor. Ele sunt supuse la manipulare usoara (inactivarea), care duce la pierderea ireversibilă a capacității virusului de a se multiplica (reproduce), dar care a păstrat proprietățile antigenice și imunogenice. Prin urmare, vaccinul inactivat trebuie „omorât“ genomul virusului (acid nucleic) și să nu sufere proteine modificări, glicoproteine, polizaharide virus, deoarece răspunsul imun se datorează în principal la suprafața substanțelor capsidei virale. Ca rezultat, virusul își pierde capacitatea de a reproduce si a infecta, dar își păstrează capacitatea de a stimula animalele factorii de imunitate specifici.
Producerea de vaccinuri inactivate, de asemenea, începe cu selectarea tulpinii producerea virusului (având în vedere proprietățile sale de bază biologice) cultivarea tulpinii de producție și acumularea virusului într-un sistem biologic (culturi de celule de embrioni de animale pasăre). Apoi, materialul care conține virusul a fost purificat și concentrat prin diverse metode (centrifugare la viteză redusă, filtrare, ultracentrifugare, etc.). Purificarea și concentrarea agenților virali - un pas important, ca „virusul a ucis“ nu este propagat în organism și pentru a obține un răspuns imun suficient de intens necesară introducerea unei cantități semnificative de material viral. suspensie virală trebuie purificată din substanțe de balast (fragmente de structuri celulare, proteine non-virale, lipide și altele.), care asigură o încărcare suplimentară a sistemului imunitar al organismului și de a reduce în mod semnificativ puterea și specificitatea răspunsurilor imune. S-a obținut după purificare și concentrare a suspensiei care conține virusul este supus inactivare. În cazul virusurilor deosebit de periculoase inactivare precede procesul de curățare. Trebuie amintit că substanțele de balast împiedică procesul de inactivare.
O condiție importantă pentru eficacitatea vaccinurilor este alegerea inactivatorul și condițiile optime pentru inactivarea care permit complet priva infectivitatea virusului la conservarea maximă a antigenității. Cu toate acestea, mecanismul efectelor inactivare prost înțelese și utilizarea lor este adesea empirică.
Pentru inactivarea virusurilor prin metode fizice și chimice. Dintre metodele fizice sunt cele mai abundente y, raze ultraviolete, efectele temperaturii, efectele fotodinamica mai puțin cu ultrasunete a unor coloranți (albastru de metilen, portocaliu acridina, toluidina, etc.). Cele mai vulnerabile ținte pentru radiatii gamma sunt bazele purinice și pirimidinice. strat de proteine este deteriorat de radiație este neglijabilă. Această metodă face posibilă inactiva simultan în siguranță, și se sterilizează produsul finit.
Eficiența razele UV este determinată de permeabilitatea și adsorbția moleculelor biologice a acestora. Proteinele absorb razele UV într-o măsură mai mică decât acizii nucleici și, prin urmare, sunt mai rezistente la acțiunea lor. Se crede că, sub influența razelor UV în dimerii acid nucleic piramidinovymi între baze adiacente, iar legătura covalentă între un acid nucleic și un înveliș proteic.
În practică, crearea de vaccinuri inactivate cel mai larg utilizat inactivators chimice, cum ar fi formaldehida (atașare formaldehidă la grupări amino de purine și pirimidinei distruge solul și informații Activitatea de acid nucleic), β-propiolactonă, hidroxilamină etilenimină (efect de inactivare este determinat prin reacția sa cu bazele pirimidinice de nucleic Acid, în funcție de valoarea pH-ului), și alții. reactivii care sunt folosite pentru a inactiva virusurile sunt mutageni, totuși inak ivator trebuie să fie supuse fie auto-dezintegrare β-propiolactonă, hidroxilamină) sau tradusă într-o formă inactivă (neutralizate), și neutralizarea produselor - să rămână în condiții de siguranță.
După controlul inactivare efectuat pe avirulenței avut ca scop identificarea virionii viabile rămase. Gradul de siguranță al vaccinurilor inactivate este indisolubil legată de sensibilitatea unui sistem de testare pentru evaluarea completitudinii inactivare virală. In acest scop, celulele animale sensibile la cultură, inclusiv embrioni aviar. În acest caz, reproducerea virusului nu ar trebui să fie.
Abordarea individuală determinată de proprietățile virusului, caracteristicile bolii, sensibilitatea sistemelor biologice. Astfel, vaccinurile avirulenței împotriva febrei aftoase se determină la bovine (este mai fiabil) la porci, animale de laborator și culturi celulare; vaccin antirabic - șoareci albi; vaccin împotriva bolii Aujeszky - pe iepuri sau în cultură de celule, care a fost utilizat pentru acumularea virusului; vaccin împotriva bolii Newcastle - în ouă (cel puțin trei treceri oarbe). În cazul în care tulpina de producție a virusului care a fost utilizat pentru a produce un vaccin cultivate in culturi de celule, și determină modificările citopatice caracteristice, metoda convențională este inactivat medicamente de testat în culturi celulare sensibile (cel puțin trei pasaje oarbe). Cu toate acestea, utilizarea unor abordări complexe integrate în evaluarea unora dintre siguranța vaccinurilor.
Pentru a spori activitatea imunogenă a unui vaccin în compoziția sa este introdus adjuvanți - substanțe de natură diferită chimic stimulează nespecific răspunsul imun la antigene diferite. Utilizarea ca adjuvanți: hidroxid de aluminiu, aerosil, uleiuri minerale, DEAE dextran, saponină; În plus, utilizând materialul sintetizat -. Muramil dipeptide, polianioni, policationi, etc. Mecanismele de acțiune ale adjuvanților sunt diverse și nu sunt pe deplin înțelese. Unele dintre ele provoca răspunsul inflamator, în timp ce altele promovează antigenii escrow și hidroliza lor lent treime au contribuit la creșterea absorbției antigenilor de către macrofage și celule prezentatoare de antigen.
Prin adjuvanți au următoarele cerințe: acestea trebuie să fie netoxice în dozele utilizate, pentru a provoca reacții adverse în organism, nu posedă activitatea antigenică ar trebui să stimuleze dezvoltarea umorale pe termen lung și imunitatea celulară.
După adăugarea de vaccin adjuvant monitorizat pentru absența contaminanților externi (bacterii, ciuperci) prin placarea pe mediu nutritiv (MPA, MPB, MPPB, Saburo sau Czapek). creșterea microbiană nu ar trebui să fie. Apoi, vaccinul este ambalat în sticle și etichetare. Controale finale vaccin asupra parametrilor de bază: avirulenței, sterilitate, inofensivitatea, gradul admisibil de reactogenitate (la animale susceptibile), activitatea antigenică și imunogenă (la laborator și animale susceptibile) efectuează controlorii de stat, în conformitate cu specificațiile de medicament activ.
Vaccinurile inactivate sunt proprietăți mai stabile, ele sunt mai sigure. Acestea sunt folosite pentru animalele de orice vârstă și de stadiul de reproducere. Astfel de vaccinuri sunt utilizate în mod avantajos, ca măsură profilactică în ferme avantajate și zone periclitate. Cu toate acestea, aceste vaccinuri au mai multe dezavantaje:
- Tehnologia de fabricare a acestora este mult mai dificilă, datorită necesității de a obține un număr mare de material conținând virus, purificare, concentrația de antigen, inactivarea genomului viral și încorporarea în adjuvanți de vaccin;
- vaccinări trebuie efectuate în mod repetat și în doze mari;
- ele induc imunitate mai puțin intense și de lungă durată decât atunci când se utilizează vaccinuri vii;
- le aplică pot doar parenteral;
- acestea sunt mai slabe stimulează sistemului imunitar T, iar răspunsul imun local, astfel încât rezistența membranelor mucoase ale tractului respirator superior și tractul digestiv este mai puțin pronunțată decât după aplicarea vaccinurilor vii;
- poate provoca uneori stări alergice, după a doua vaccinare.
Tehnologia de producție de vaccin inactivat mai greu decât vaccinurile vii, și constă în următoarele etape:
- selectarea tulpinii de producție;
- cultivarea virusului într-un sistem biologic;
- determinarea concentrației de virus (antigen);
- inactivarea, purificarea și concentrarea materialului viral;
- adăugarea unui adjuvant;
- intrashop control;
- ambalarea, etichetarea;
- inspecția finală pentru sterilitate, avirulenței, siguranță, reactogenitate și imunogenitatea activității antigenice.
În plus față de vaccinurile tradiționale virale întregi (vii, inactivate) metode dezvoltate pentru crearea unor noi generații de vaccinuri: subunități, sintetice, produse prin inginerie genetică. Vaccinurile imbunatatite merge spre reducerea cantității de componente de balast reduce reactogenitate și imunogenitatea creșterea de droguri.
Partajați-le cu prietenii tăi